以下是细胞的订购信息：

产品名称：SHZ-88大鼠乳腺癌细胞

英文名称：Breast cancer cells of SHZ-88 rats

规格：5×105cells/瓶

产品货号：BH-C3012

培养基：DMEM培养基+10%FBS

运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

注意事项：

实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminarflow）以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作；每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面；

操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作；无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作；

小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少ClassⅡ）。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。

操作流程：

1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。

1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：

1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。

1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。

1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。

1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。

1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 

1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线

IGF1重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein

LRP10重组人 LRP10 蛋白 (His 标签) Protein

CXCL12重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 标签) Protein

CCL22重组人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 标签) Protein

TNFRSF12A重组人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 蛋白 (Fc 标签) Protein

ENTPD5重组人 ENTPD5 蛋白 (His 标签) Protein

KLK6重组人 KLK6 / Kallikrein 6 / Neurosin 蛋白 (His 标签) Protein

CALML3重组人 CALML3 蛋白 (His 标签) Protein

GNB2L1重组人 RACK1 / GNB2L1 蛋白 (His & MBP 标签) Protein

PTPRJ重组人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 标签) Protein

PTH重组人 PTH / parathyroid hormone 蛋白 (aa 32-65, GST 标签) Protein

GM2A重组人 GM2A 蛋白 (His 标签) Protein

MMP-9 基质金属蛋白酶9抗体

MRas 原癌基因M-ras抗体

MCP1 单核细胞趋化蛋白1抗体

Morphine 吗啡抗体

MG 鸡毒支原体抗体

MtTF1 线粒体转录因子1抗体

MAD1 有丝分裂抑制缺陷蛋白1抗体

10-Mar 膜相关环指蛋白10抗体

MALT1 粘膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1抗体

SHZ-88大鼠乳腺癌细胞MAdCAM-1 粘膜血管定居因子抗体

Maspin 抑癌基因抗体

MCK10 神经上皮酪氨酸激酶/乳腺癌激酶10抗体