产品名称：大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA酶联免疫试剂盒
英文名称：Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3, TRAIL R3 Elisa Kit
货号：BH-H9049
规格：48T/96T
ELISA检测概述
      ELISA酶联免疫试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

自备物品:
1.     酶标仪（450nm）
2.     高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒温箱

 大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA酶联免疫试剂盒实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤:
1.        标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.         配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.         温育：操作同3。
8.         洗涤：操作同5。
9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
IL5 Others Canine 狗 IL5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-二丙磺酸钠质量规格：>98% 2,3-dimercapto-1-propanesulfonate

CM-M009小鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基100mL硫酸铈铵质量规格：AR,>98%Ammonium ceric sulfate

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 小鼠成纤维细胞,3T3/e细胞 J774A1(单核细胞巨噬细胞)硫代乙酰胺质量规格：AR, ≥99.0%Thioacetamide

小鼠前胃癌细胞;MFC磺基罗丹明101质量规格：>97%Sulforhodamine 101; Sulforhodamine 640

PRMT5 Others Human 人 PRMT5 人细胞裂解液 (阳性对照) 金胺O（标准品）质量规格：检查AURAMINE O
HCT 116人结肠癌细胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级475MLRT

TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)玫瑰桃红 R BORDqcUX RqD 2828-33-3

人视网膜色素上皮细胞(HRPEpiC)(5×105 ) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 HumanBOC-D-LeucineN-叔丁氧羰基-D-亮酸5克BR，98%

人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7铟，英文名或英文缩写：Indium，级别：AR，98.5%，规格：100毫升

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照) (烟酸
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA酶联免疫试剂盒CM-R068大鼠肾小管平滑肌细胞完全培养基100mL维生素C测试盒1000支/包RT

IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-己1;丁基1 1-Hqxqnq;Hqxylqnq;Butylqthylqnq 29-41-6

小鼠前脂肪细胞完全培养基 100mL血清兔抗鼠血清1包

B16-F0-EGFP (稳定株)小鼠色素瘤细胞 B16-F0-EGFP (stable sain) of mouse melanoma cells DMEM+10% FBS+200ug/ml G418wo7iumACETATE,3MSTERILESOLUTION,pH5.2醋酸钠溶液生物技术级透明无色液体RTsigma

IL35 Protein Human 重组人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 标签)4-基乙酸盐酸盐, 98+%NA
HepG2/2-15细胞，人肝癌细胞 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,RAW 264.7细胞 大耳山羊皮肤细胞;LDG-3木蝴蝶苷B（标准品）Oroxin B质量规格：HPLC≥98%，标准品

MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×21霉素氨丁三醇Fosfomycin tromethamine质量规格：>98%,BR

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 内皮细胞生长培养基2型套装 500ml1霉素氨丁三醇(标准品)Fosfomycin tromethamine质量规格：含量测定

人真皮成纤维母细胞-胎儿HDF-f木犀草苷(标准品)Cynaroside质量规格：HPLC≥98%，标准品

CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人细胞裂解液 (阳性对照) 木香烃内酯(标准品)Costundide质量规格：HPLC≥98%，标准品
应用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体（本产品仅供实验室科研及非临床用途）