应用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体（本产品仅供实验室科研及非临床用途）
ELISA检测概述
      ELISA酶联免疫试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

产品名称：大鼠透明质酸(HA)ELISA酶联免疫试剂盒
英文名称：Rat Hyaluronic acid, HA Elisa Kit
货号：BH-H8920
规格：48T/96T
自备物品:
1.     酶标仪（450nm）
2.     高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒温箱

 大鼠透明质酸(HA)ELISA酶联免疫试剂盒实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人细胞裂解液 (阳性对照) 芦荟大黄素(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Aloeemodin

心脏微血管内皮细胞cDNAHCMEC cDNA细胞色素C(马源)质量规格：>95%,BR，来源马心Cytochrome C

SLPI Others Human 人 SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 细胞色素C(牛源)质量规格：>95%,BR，来源牛心Cytochrome C

大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6细胞色素C(猪源)质量规格：>95%,BR，来源猪心Cytochrome C

95-D细胞，高转移肺癌细胞 人喉癌细胞,M2e细胞 正常大鼠肾细胞;NRK卢立康唑质量规格：>98%,BRLuliconazole
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-酰-L-谷酰，英文名或英文缩写：Alu-Gln，级别：BR，99%，规格：5克

长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184三溴新务醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2

BHK细胞，幼仓鼠肾细胞 人胰腺癌细胞,CFPAC-1细胞 CM-R093大鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸电泳上样缓冲液,30%甘油超级暗紫色微粘稠液体COLDsigma

大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J5′-CTP，3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三钠盐500UBR，95%

RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
大鼠透明质酸(HA)ELISA酶联免疫试剂盒HCCC-9810细胞，人胆管细胞型肝癌细胞 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性,NFS-60细胞 水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技术级COLDsigma

MDBK(牛肾细胞) 5×106cells/瓶×2黄蓍树胶粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用试剂

Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌细胞生长培养基套装 500ml单唾液神经节苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7

kasumi-1, 人白血病细胞株Atr莠去津5克超，100mM

ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人细胞裂解液 (阳性对照) 32449-92-6D-葡糖醛酸内酯D-Glucurone
视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)舒缓激肽三醋酸盐Bradykinin acetate质量规格：>98%

DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照) α-促激素,素皮质素α-MSH质量规格：>95%

杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7内皮素-1，人，猪Endothelin-1, human,porcine质量规格：>95%

GLC-82细胞，人肺腺癌细胞 转S9基因仓鼠卵巢细胞,ZA6细胞 CL-0050Caco-2(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2蛙皮素,胃泌素Bombesin质量规格：>95%

SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞) 5×106cells/瓶×2血管活性肠肽VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)质量规格：>95%

操作步骤:
1.        标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.         配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.         温育：操作同3。
8.         洗涤：操作同5。
9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。