上海一研生物科技有限公司
主营产品: 生化试剂 ELISA试剂盒, 检测试剂盒, 免疫组化试剂盒, 分子生物学试剂盒
禽肾炎病毒通用PCR检测试剂盒
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清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
禽肾炎病毒通用PCR检测试剂盒 | Avian Nephritis Virus(ANV)RTPCR | 50T |
普通PCR反应流程:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
反应五要素:
禽肾炎病毒通用PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
使用方法 :
1 实验所需器材与试剂
1.1 器材
1)PCR仪
2)PCR反应管
3)电泳仪及水平电泳槽
4)高速离心机
5)微量移液器及移液器吸头
1.2 试剂
1)琼脂糖
2)EB(溴化乙锭)
3)去离子水或双蒸水
注意事项:
5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。
5.2 操作时应尽量少说话,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性;整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。 5.3 实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。
5.4 反应管中加好所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免形成过多的二聚体。
5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度,建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。
现货促销 L(+)阿拉伯糖 规格: 30mgAucubin
现货促销 蔗糖 规格: 50mgSpecnuezhenide
现货促销 D-木糖 规格: 50mgGambogic acid
现货促销 三十烷醇 规格: 20mgGastrodin
现货促销 异龙脑 规格: 20mgBetaine
现货促销 7-甲氧基 规格: 20mgStevioside
现货促销 棉酚 规格: 20mgRubusoside
现货促销 升麻苷 规格: 20mgRutundicacid
现货促销 毛两面针素 规格: 20mgTenacissoside F
现货促销 富马酸 规格: 20mgTenacissoside H
现货促销 荆芥油 规格: 0.2mlTenacissoside I
现货促销 生姜油 规格: 0.2mlDamascenone
现货促销 莪术油 规格: 0.2mlPseudolaric Acid B
现货促销 八角茴香油 规格: 0.2mlAlantolactone
现货促销 鱼腥草油 规格: 0.2mlEcdysterone
现货促销 牡荆油 规格: 0.2mlMelatonin
禽肾炎病毒通用PCR检测试剂盒小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP47(Heat shock protein-47 1g
小鼠5羟色胺(5-HT)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP-60( Heat shock protein-60 1kg
小鼠5核苷酸酶(5-NT)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原 100g
小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha 250mg
小鼠17羟孕酮(17-OHP)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta 5mg
小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha 500mg
小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HSTF2/HSF2 peptide 热休克转录因子2抗原 100mg
小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)HtrA2/Omi peptide 丝氨酸蛋白酶/线粒体丝氨酸蛋白酶多肽抗原 25mg