上海一研生物科技有限公司
主营产品: 生化试剂 ELISA试剂盒, 检测试剂盒, 免疫组化试剂盒, 分子生物学试剂盒
禽副粘病毒通用PCR检测试剂盒
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订货量(盒)
¥2880.00
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反应五要素:
禽副粘病毒通用PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
禽副粘病毒通用PCR检测试剂盒 | Avian Paramyxovirus (APMV)RTPCR | 50T |
普通PCR反应流程:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法 :
1 实验所需器材与试剂
1.1 器材
1)PCR仪
2)PCR反应管
3)电泳仪及水平电泳槽
4)高速离心机
5)微量移液器及移液器吸头
1.2 试剂
1)琼脂糖
2)EB(溴化乙锭)
3)去离子水或双蒸水
注意事项:
5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。
5.2 操作时应尽量少说话,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性;整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。 5.3 实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。
5.4 反应管中加好所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免形成过多的二聚体。
5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度,建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。
现货促销 青阳参苷元 规格: 20mgschisandrin A
现货促销 西红花苷-Ⅱ 规格: 20mgSchizandrin B
现货促销 重楼皂苷Ⅱ 规格: 20nmSchisantherin A
现货促销 重楼皂苷Ⅵ 规格: 10mgschisantherin B
现货促销 重楼皂苷Ⅶ 规格: 10mgSipeimine
现货促销 总银杏酸(套) 规格: 30mgimperialine-e--D-glocoside
现货促销 胡黄连苷-Ⅱ 规格: 20mgSibiricaxanthone B
现货促销 雷公藤酯甲 规格: 20mgSibiricose A5
现货促销 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯 规格: 20mgSibiricose A6
现货促销 丹参酮ⅡA磺酸钠 规格: 20mgCrocin
现货促销 金龙胆草提取物 规格: 500mgCrocin I
现货促销 苯丙氨酸 规格: 20mgCrocin II
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现货促销 二甲基甲酰胺 规格: 0.5mlorientalinA
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现货促销 氧化锌 规格: 100mgSiegesbeckicacid
禽副粘病毒通用PCR检测试剂盒豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)IDE 胰岛素降解酶(抗原 1g
豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein 250mg
豚鼠生长激素(GH)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1 100mg
豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) IFN- Beta (Interferon Beta 1mg
豚鼠内皮素1(ET-1)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)IFN- Beta (Interferon Beta 1g
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)IFN- Gamma(Interferon Gamma 5mg
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)IFN- Gamma(Interferon Gamma 5mg
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) IFNGR1/CD119 peptide 干扰素-gamma受体1抗原 250mg