组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

普通PCR反应流程：

准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

使用方法 ：   

1 实验所需器材与试剂

1.1 器材

1）PCR仪

2）PCR反应管

3）电泳仪及水平电泳槽

4）高速离心机

5）微量移液器及移液器吸头

1.2 试剂

1）琼脂糖

2）EB（溴化乙锭）

3）去离子水或双蒸水

注意事项：   

温和气单胞菌PCR检测试剂盒5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。

5.2 操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。 5.3 实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。

5.4 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。

5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。

现货促销 东莨菪碱 规格: Proteinase K,recomb.,PCR Grd.S

现货促销 东莨菪内酯/东莨菪素 规格: FastStart TaqMan Probe Master

现货促销 冬绿苷 规格: FastStart SYBR Green Master

现货促销 豆腐果素 规格: Expand High Fidelity PCR System, dNTPack(up to 5 kb)

现货促销 豆腐果新苷A 规格: FastStart High Fidelity PCR System, dNTPack（up to 5 kb）

现货促销 豆腐果新苷B 规格: Expand High Fidelity PCR System ( up to 5 kb)

现货促销 豆蔻明 规格: Expand High FidelityPLUS PCR System 500 U(up to 5 kb)

现货促销 杜鹃素Taq DNA Polymerase (1u/ul)dNTP

现货促销 断血流皂苷A/醉鱼草皂苷 Ⅳb 规格: Taq DNA Polymerase dNTPack 500

现货促销 对羟基苯甲酸乙酯 规格: Expand High FidelityPLUS PCR System, dNTPack（up to 5 kb ）

现货促销 对香豆酸 规格: Taq DNA Polymerase dNTPack 100

现货促销 对叶百部碱FastStart Taq DNA Pol. dNTPack

现货促销 多烯紫杉醇 规格: FastStart High Fidelity PCR System 500 U(up to 5 kb)

现货促销 莪二酮(莪术二酮/姜黄二酮) FastStart Taq DNA Pol. dNTPack

现货促销 莪术醇 规格: Proteinase K,recomb.,PCR Grd.l

现货促销 二氢丹参酮 I 规格: Expand High FidelityPLUS PCR System 2,500 U(up to 5 kb)
小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)Caspase-6 (NT 500ML

小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)Caspase-8 (pro Mch5 5G

小鼠孕酮受体(PROGR)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) Caspase-9   白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6（抗原 25G

小鼠孕激素/孕酮(PROG)Elisa Kit(化学发光免疫分析法) Caspase-9  白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6（抗原 1G

小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)cath-B/CB(Cathepsin B 1g

小鼠游离脂肪酸(FFA)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)cath-L/CL peptide  组织蛋白酶L抗原 25G

小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)Cav-1/ETM1 peptide  细胞质膜微囊蛋白-1抗原 1g

小鼠游离甲状腺素(FT4)Elisa Kit(化学发光免疫分析法)CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2 1g
反应五要素：

温和气单胞菌PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。