使用方法:

一、犬附红细胞体（犬嗜血支原体）LAMP试剂盒50次稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。

1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。

3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。

8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。

三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。

产品名称：犬附红细胞体（犬嗜血支原体）LAMP试剂盒50次

英文名称：Lamp kit for Eperythrozoon canis

产品货号：GOY6808

产品规格：50次

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

PCR反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 

下列是犬附红细胞体（犬嗜血支原体）LAMP试剂盒50次的相关热销产品：
3-炔-1-醇 97%CopineⅠ蛋白(CPNE1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

1,4-双(三基硅烷基)-1,3-二炔 98%N-酰转移酶8(NAT8)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

双(三苯基膦)氯化镍(Ⅱ) 98%N-酰转移酶10(NAT10)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

双(频哪醇合)二 98%Battenin蛋白(BTS)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

叔基二基硅烷基三氟烷磺酯 98%肌氨脱酶(SARDH)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

3-溴吡啶 98%小脑肽4(CBLN4)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

苯并呋喃 99%精脒/精胺N1-酰基转移酶1(SAT1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

苄基氯基醚 60%精脒/精胺N1-酰基转移酶2(SAT2)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

3-溴-5-酰基吡啶 97%多胺酶(PAOX)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

2-溴-5-硝基吡啶 98%甘胺-N-基转移酶(GNMT)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

3-溴-5-羟基吡啶 97%肌醇单酶2(IMPA2)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

3-溴-5-氯吡啶 97%肌醇单酶1(IMPA1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

5-溴-2-氰基吡啶 97%肌原调节蛋白1(MYOZ1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

2-溴-3-吡啶醛 97%筑丝蛋白3(TEKT3)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)

5-溴-1-烯 95%筑丝蛋白1(TEKT1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)
犬附红细胞体（犬嗜血支原体）LAMP试剂盒50次Rhizoma menispermi北豆根探针法PCR鉴定试盒   负20度 一年2-4周 低温

Radix glehniae北沙参探针法PCR鉴定试盒   负20度 一年2-4周 低温

Fructus piperis longi荜茇探针法PCR鉴定试盒     负20度 一年2-4周 低温

旋复花内酯KG-1(细胞) 

雪胆素KP-N-NS(上腺神经母细胞瘤细胞()) 

雪胆素L1210(细胞) 

雪松L6(大成肌细胞 ) 

血根50L6565(小L6565克隆细胞系) 

血竭素430663     5mlL929(成纤维细胞)  
技术保护点:

一种用于检测螺旋体的LAMP引物组，其特征在于，包括一对外引物和一对内引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述内引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向内引物和反向内引物。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！