细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠牙乳头组织提取物【Teeth: Normal Rat Dental Papilla Derivatives】
产品描述：牙乳头组织是在牙发育过程中，成釉器下方的球形细胞凝聚区称为牙乳头，将来形成牙本质和牙髓。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠牙乳头组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。   

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。       

潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱

注意事项：
1. 接收到大鼠牙乳头组织提取物，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
产品仅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

以下是公司正在热销的产品：
SW480 [SW-480]人结肠腺癌细胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBSβ-D-葡糖糖-6-1酸钠盐D-Glucose 6-phosphate  salt 质量规格：98%，美国进口

CD40LG Protein Rat 重组大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)NADPH;还原辅酶Ⅱ四钠盐;(美仑)Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)质量规格：>97%,国产美仑

人羊膜上皮细胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原细胞 Mouse葡萄糖氧化酶Glucose oxidase质量规格：BR,>200U/mg

人癌细胞;MCF7溶菌酶(蛋清)Lysozyme,from egg white质量规格：2万U/mg,分子生物学级

人脐静脉内皮细胞(HVVEC)( 5×105 )HRP;辣根过氧化物酶Peroxidase, Horseradish(HRP)质量规格：BR,RZ>2.5,活性>250U/mg
ECV-304细胞，人脐静脉内皮细胞 铜绿假单胞杆菌(绿脓杆菌) 人真皮成纤维细胞-总RNAHDF-a NA小白菊内酯Parthenolide质量规格：0.8%内酯含量,BR

R 1610(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2小白菊内酯Parthenolide质量规格：>98%标准品

ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0263BGC-803(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2 猫肾细胞;F81利扎曲坦Rizatriptan质量规格：>98%

小鼠肾足细胞;Mouse podocyte地瑞那韦乙醇盐Darunavir Ethanolate质量规格：>99%,BR

人小脑星形胶质细胞( Hac) (1×106 )维拉佐酮Vilazodone质量规格：>98.5%,BR
大鼠牙乳头组织提取物大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919]四乙基录化shēng huà shì jì容量：5克

PGC Others Rat 大鼠 Pepsinogen C / PGC 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,6-二基 2,6-DiMqthylncphclqnq 281-4-0

B16瘤 色素瘤3-羟基本酸，英文名或英文缩写：3-xy7noxybenzoic acid，级别：CP，99%，规格：50毫克

A549-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人肺癌细胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin对硝基本基-β-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量：RT25克

GDNF Protein Rat 重组大鼠 GDNF 蛋白 (His 标签)7440-69-9铋BisMuth