冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。产品仅供科研使用

参数规格：
小鼠子宫组织提取物【Uterus: Normal Mouse Uterus Derivatives】
产品描述：子宫是雌性生殖器官的一部分，是动物胎儿或幼体发育生长的场所，位于骨盆腔中央，在膀胱与直肠之间。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠子宫组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

实验要点及说明 ：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
培养操作:
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。产品仅供科研使用
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-5β-淀粉酶(酶活5万粉末)质量规格：BR,酶活5万,粉末beta-Amylase

CLPS Others Human 人 CLPS / Colipase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DNA酶,脱氧核糖核酸酶Ⅰ质量规格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)Deoxyribonuclease

CL-0185PC-3(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2烟酰胺/尼克酰胺/维生素B3质量规格：>99%,BRNicotinamide

Raji，人Butt's瘤细胞 人晶体上皮细胞系，SRA01/04细胞 C6(胶质瘤细胞)维生素B3(标准品)质量规格：HPLC≥99%,标准品Nicotinamide

人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15]醋酸环丙孕酮,醋酸环丙氯地孕酮质量规格：>98%,BRCyproterone acetate
人食道上皮细胞总RNAHEEpiC NA亮绿SF(淡黄)Light Green SF Yellowish质量规格：BS

TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人细胞裂解液 (阳性对照) 健那绿BJanus Green B质量规格：BS

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21酸性绿3Guinea Green B质量规格：BS，进口原装

PC-2细胞，人胰腺癌细胞 人皮肤癌细胞系,HS-4细胞 小鼠色素瘤瘤株;B16酸性绿 50 Lissamine™ Green B质量规格：BS,进口原装

Hut-102(人皮肤T瘤细胞) 5×106cells/瓶×2酸性绿AAcid Green A质量规格：BS,>97%,进口分装
小鼠子宫组织提取物NCI-H929-UBC-EGFP(稳定株)人骨髓瘤细胞 NCI-H929-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(热灭活)香荆芥酚，英文名或英文缩写：Carvacrol，级别：AR，99%，规格：100克

IL25 Protein Human 重组人 IL25 蛋白 (Fc 标签)1,1'-羰基二 CDP,98% 81759-25-3 1G 通用试剂

人星形胶质细胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记) MouseL-亮安醋;;;安基异己醋 L-Lqucinq;L-2-cMino-4-Mqthylpqntcnoic ccid;L-α-cMinoisobutylccqtic ccid;L-α-cMino-γ-Mqthylvclqric ccid 61-90-2

CM-H073人膀胱成纤维细胞完全培养基100mL盐酸三shēng huà shì jì容量：5克

TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人细胞裂解液 (阳性对照) 36546-50-6N-乙酰-L-酪酸乙酯;N-乙酰-L-3-(对羟基本)乙酯N-Acetyl-L-tyrosine etxyl ester;ATEE
收到小鼠子宫组织提取物如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。             

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。     

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。            潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。