小鼠肺大动脉组织提取物【Mouse Lung: Normal Artery Derivatives】
产品描述：肺大动脉管壁分为内膜、中膜和外膜，各层结构随动脉分支而变化，以中膜变化最大，其管壁含大量弹性膜和弹性纤维。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠肺大动脉组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。             

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。     

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。            潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。产品仅供科研使用

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：
1. 接收到小鼠肺大动脉组织提取物，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
产品仅供科研使用2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
以下是公司正在热销的产品：
大鼠白介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒RatIerleukin23,IL-23ELISAKit 96T/48T 柠檬酸 HPLC≥98% 5mg

大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA检测试剂盒RatLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T 柠檬酸 HPLC≥98% 200mg

大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA检测试剂盒RatleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 96T/48T 柠檬醛(>95%,Pract Grade)  Citral  质量规格：>95%,Pract Grade

大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA检测试剂盒RatCystatinC,Cys-CELISAKit 96T/48T 柠檬醛 GC≥95% 0.5ml

大鼠补体蛋白3(C3)ELISA检测试剂盒RatCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T 柠檬苦素；吴茱萸内酯(标准品,吴茱萸提取)  Limonin  质量规格：HPLC≥98%，标准品,吴茱萸提取

大鼠补体蛋白4(C4)ELISA检测试剂盒RatCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T 柠檬苦素，黄柏内酯(橙皮提取)   Limonin  质量规格：HPLC≥98%,橙皮提取

大鼠补体片断3a(C3a)ELISA检测试剂盒RatComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T 柠檬苦素，黄柏内酯(标准品,橙皮提取)   Limonin  质量规格：HPLC≥98%,标准品,橙皮提取

大鼠补体片断5a(C5a)ELISA检测试剂盒RatComplemefragme5a,C5aELISAKit 96T/48T 柠檬苦素 HPLC≥98% 20mg

大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测试剂盒RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T 柠檬黄素 HPLC≥95% 20mg

大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T 镍粉(>99.5%,SP)  Nickel powder  质量规格：>99.5%,SP
枣椰树(datepalm)培养基500毫升溶液/片剂 非布索坦  Febuxostat  质量规格：≥99%

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脱氢表雄同(DHEA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 非布索坦(标准品)  Febuxostat  质量规格：HPLC≥98%,标准品

小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒 ，英文名： DHT ELISA Kit 非那西丁  Phenacetin  质量规格：>99%,AR

小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA检测试剂盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 96T/48T 非那西丁(标准品)  Phenacetin  质量规格：HPLC>98%,标准品

人高香草酸(HVA)试剂盒 Human Homovanillic acid,HVA ELISA Kit 盐酸芬戈莫德  Fingolimod HCL /FTY-720  质量规格：≥99.0%,BR,可用于细胞培养

RatgranzymesB,Gzms-BELISAKit大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸芬戈莫德(标准品)  Fingolimod HCL /FTY-720  质量规格：HPLC≥98%,标准品

BAD蛋白共沉淀分析试剂盒5 氟芬那酸,氟灭酸  Flufenamic acid  质量规格：>99%

MouseinhibinB,INH-BELISA试剂盒小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氟芬那酸,氟灭酸(标准品)  Flufenamic acid  质量规格：HPLC≥99%,标准品

小鼠双酪酸(dityrosine)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 氟马西尼/氟马泽尼  Flumazenil  质量规格：>99%,USP31

Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒 氟马西尼/氟马泽尼(标准品)  Flumazenil  质量规格：>99%,标准品
小鼠肺大动脉组织提取物人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)试剂盒 Human lumican,LUM ELISA Kit 甜菜碱（标准品）  Betaine  质量规格：HPLC≥98%，标准品

人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒 Human Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit 美伐他汀(标准品)  Mevastatin  质量规格：>95%,标准品，用于含量测定

操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。