人前脂肪细胞
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人前脂肪细胞【HumanAdipose:Preadipocytes】
产品描述:脂肪细胞在能量储存和代谢过程中有着重要的作用。脂肪细胞分化是一个发展的过程,它对代谢稳态和营养信号很重要。它由复杂的过程控制,如基因表达和信号转导。前脂肪细胞存在于成人脂肪组织中,能根据能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪细胞。前体细胞的增殖和分化能够增加脂肪组织的体积。在体外培养中,不同的组织来源前脂肪细胞的油脂含量,成脂转录因子表达和TNFalpha诱导的凋亡均有不同。同时研究表明它还与脂肪分化以及许多生理病理过程密切相关,如脂肪代谢、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。公司提供的人前脂肪细胞均来自新鲜组织,用于培养人前脂肪细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人前脂肪细胞培养试剂盒(HumanAdiposePrimaCell:PreadipocytesCatNo.3-0764)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,人前脂肪细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在公司生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
产品名称 | 人前脂肪细胞 |
英文名称 | HumanAdipose:Preadipocytes |
货号 | GOY-Y6368 |
冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明 :
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠红白血病细胞;MEL 小鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL依曲韦林-13C3Etravirine-13C3
大鼠主动脉平滑肌细胞 Rattus法莫替丁相关化合物A盐酸盐Famotidine Related Compound A Hydrochloride
SDC1 Others Mouse 小鼠 SDC1 / Syndecan-1 / SYND1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-羟基查耳酮(>98.0%(GC)(T))2-Hydroxychalcone质量规格:>98.0%(GC)(T)
颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)2'-羟基查耳酮(>98.0%(HPLC))2'-Hydroxychalcone质量规格:>98.0%(HPLC)
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-二甲基氨基-4'-硝基茋(>98.0%(HPLC)(T))4-Dimethylamino-4'-nitrostilbene质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
大鼠肾小球系膜细胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)羟甲基达沙替尼Hydroxymethyl Dasatinib
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)N-去羟乙基达沙替尼-d8N-Deshydroxyethyl Dasatinib
NCI-H1975(人肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4'-羟基达沙替尼4'-Hydroxy Dasatinib
少突胶质前体细胞分化培养基OPCDM14-氯柔红霉素14-Chloro Daunorubicin
PIANP Others Human 人 C12orf53 人细胞裂解液 (阳性对照) 多1紫杉醇代谢物M4Docetaxel Metabolite M4
VCaP(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7苯丙氨酯(标准品)质量规格:含量测定Phenprobamate
人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L哈西奈德(标准品)质量规格:含量测定Halcinonide
PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化胆碱(标准品)质量规格:TLC法检查Choline chloride
人急性T细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)灵芝酸G(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ganoderic acid G
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C8 透明质酸酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL6α-甲基21-醋酸盐6α-Methylprednisolone 21-Acetate
人前脂肪细胞EB病毒转化的人B细胞;KMY0911食用色素亮蓝,英文名或英文缩写:Erioglaucine diwo7ium salt,级别:BS,84%,规格:5克
THY1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD90 / THY-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 缩二脲;安基酰脲;安缩脲;二缩脲 Biurqt;cllophcMic ccid cMidq;CcrbcMylurqc;IMidodiccrbonic dicMidq 108-19-0
CM-H074人尿道上皮细胞完全培养基100mL四羟酮醇S,英文名或英文缩写:Thioflavine S,级别:BR,470/570NM,规格:25克
CCC-HIE-2细胞,人胚胎肠粘膜细胞 人成骨肉瘤细胞,MG-63细胞 人胚肺成纤维细胞;IMR-90微量可调移液器P101克保存:-20℃
F81(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2(聚酮)
收到人前脂肪细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。