参数规格：

产品名称：人参源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒运输

英文名称：

货号: GOY-M4709

产品规格：50T

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品及特点:

是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测 鲍疱疹样病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 的试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。

2. 根据 鲍疱疹样病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的

鲍疱疹样病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 成分，但不能检测其他非 鲍疱疹样病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 成分。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。

5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。

6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。

操作步骤：

下列图示以Venor Gem OneStep 支原体 常规PCR 检测试剂盒 (一步法)，具体产品操作以说明书为准。

第1步：样本处理：

第2步：试剂制备：

第3步：PCR体系建立：

第4步：启动PCR反应

第5步：电泳结果分析

191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。

当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞103拷贝）。

阳性对照中支原体DNA＞104拷贝，内控对照条带会完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。

如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒），然后再检测。

实时荧光定量PCR：

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：

1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。

2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。

外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性最好的定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。

使用方法：

一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）

1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。

3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。

4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

二、样品DNA的制备

8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。

9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。

三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）

10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。

11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）

f超微量Ca2+Mg2+-ATP酶测定试剂盒（比色法）                    Aurantio-obtusin  中文名：橙黄决明素  分子式：C17H14O7 

超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、T－ATP酶）  Withaperuvin C  81644-34-0  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  关键词：  酸浆属; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

超土壤基因组DNA快速提取试剂盒   Rapid exaction kit for genomic DNA in soil                 Panaxyne  122855-49-6  中文名：  分子式：C14H20O2 

肠道病毒EV71核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T                 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H29NO3 

产品名称   Serum low-density lipoprotein (LDL) test kit  Oxytetracycline hydrochloride  中文名：盐酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9

Estradiol heptanoate  4956-37-0  中文名：庚酸雌二醇  分子式：C25H36O3    Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Estradiol valerate  979-32-8  中文名：戊酸雌二醇  分子式：C23H32O3    豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Cyproterone acetate  427-51-0  中文名：醋酸环丙氯地孕酮  分子式：C24H29ClO4    Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒

Megestrol acetate  595-33-5  中文名：醋酸甲地孕酮  分子式：C24H32O4    Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗肾小球基底膜抗体(GBM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Altrenogest  850-52-2  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2    HumanCyclophosphamide,CTXELISA试剂盒人环0酰胺(CTX)ELISA试剂盒规格：96T/48T细菌营养肉汤500毫升  2-Acetamidothiazole  2719-23-5  中文名：2-乙酰氨基噻唑  分子式：C5H6N2OS  度：99.0%  关键词： 

细菌营养琼脂平板50个  2-Acetyl-3-ethylpyrazine  32974-92-8  中文名：2-乙酰基-3-乙基吡嗪  分子式：C8H10N2O  度：99.0%  关键词： 

细菌印度墨负性染色试剂盒50次  2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  关键词： 

细菌异化型盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次  2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone  2011-66-7  中文名：2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮  分子式：C13H9ClN2O3  度：98.0%  关键词： 

细菌乙酰甲基原醇V-P检测试剂盒20次  2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone  2797-51-5  中文名：2-氨基-3-氯-1,4-萘醌  分子式：C10H6ClNO2  度：99.0%  关键词：

人参源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒运输Betaine,Hydrochloride   500g  Pilosol A  中文名：  分子式：C13H12O 

Baciacin   250KU                 4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S 

AzureB   5g  4,9-Dihydroxy-α-lapachone  56473-67-7  中文名：  分子式：C15H14O5 

ATP酶测试盒（测普通组织匀浆的Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶，样本前处理不需高速离心）                    Raltegravir  518048-05-0  中文名：雷特格韦  分子式：C20H21FN6O5 

ATP酶（、钙ATP酶）检测   Any one, sodium potassium calcium and  ATP enzyme detection                 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS

服务流程：

人参源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒运输1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）

2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录

3、实时荧光定量PCR

4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)

5、返还样品（引物、RNA和cDNA）