【检测原理】
利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶，使模板两端引物结合处循环出现环状 单链结构，引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应，实现在恒温条件下(60~65°C)进行连 续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接通过颜色变化判读结果。

【产品特点】

1. 快速简便:将酶、引物等反应组分混匀后进行干粉化处理，增加试剂稳定性，使用时减少

   溶液配制步骤，更为便捷，整个检测反应可在 1 h 内完成;

2. 特异性高:利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引物，扩增反应的高度特异性;

3. 灵敏度高:检验限达到 10 CFU/Test;

4. 判读简单:反应前加入显色指示剂，反应后通过肉眼观察反应液颜色变化或者经荧光监测

   仪器跟踪荧光图谱的变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应后开盖造成的气溶胶污染。

   
   

   【储存条件与保质期】 2~8°C条件下储存，有效期为 12 个月
   

【适用仪器】
1. PCR 仪器或金属浴恒温器。

2. 高速离心机，用于样品前处理。

【样品类型】
增菌液、可疑菌落样品以及 DNA 样品等。

【使用指南】

1. 样品前处理
A. 样品增菌液模板 DNA 的制备:

1. a)  取取 25 g 待检样品置于 225 mL PDB 增菌肉汤中，36 °C±1 °C增菌 8~12 h。该步骤也可依 照实验室自行建立的方法进行增菌。

2. b)  取以上增菌液 1 mL 到 1.5 mL 规格的无菌离心管中，6000 r/min 离心 5 min，完全去除上清;

3. c)  加入 30 μL 裂解液充分悬浮管底沉淀，轻弹管壁气泡，99°C加热 10 min。

4. d)  12000 r/min 离心 15 min，上清即为待测样品 DNA，静置冰上，长时间不用应再次离心。

B. 可疑菌落模板 DNA 的制备:

挑取可疑菌落半环到含 30 μL 裂解液的无菌离心管，充分悬浮后按照上述步骤 c)、d)操作。 2. 试剂混合、加样
A. 阴、阳性对照复溶

使用时，加入80 μL超纯水至阳性对照和阴性对照冻干粉中，待溶解后混匀，-20°C存

储待用。

B. 干粉试剂复溶、加样

1. 1)  取出冻干粉试剂，按照需求剪取 n 个检测试剂管(n=待检测样品数+1 管阳性对照+1 管阴性

   对照)，每管加入复溶液 20 μL;

2. 2)  向上述已加入复溶液的 n 个反应管中各加入显色指示剂 2.5 μL;

3. 3)  向上述 n 个反应管中依次分别加入阴性对照、待测样品 DNA、阳性对照各 2.5 μL，每个加

   样后立刻盖紧盖子。

3. 扩增反应
   使用能够提供恒温条件的仪器(有热盖功能优先)，设置温度到 64°C，放入检测管恒温反应 50 min。

4. 结果判读 反应结束后在自然光线充足的环境条件下，将样品置于白色背景下观察，阴性对照检测管呈 淡橙色，阳性对照检测管呈荧光绿，待测样品反应管以此作为对照进行判读，若阴阳对照反 应管任一结果与上述情况不符，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。

【注意事项】

1. 检测空间应严格分区操作，在空间条件允许情况下，试剂配置区用于配置反应所需要的所有试剂;样品前处理区用于待测样品的核酸提取和模板的加入;扩增观察区用于反应进行 和结果判读。各区内空间独立，试验用品专用，避免交叉污染。另外，样品处理区建议配 备超净工作台，并且所有步骤严格按照说明书的要求进行。

2. 检测过程中建议穿洁净工作服，带一次性手套，使用的枪头需提前。

3. 干粉检测试剂在使用前低速离心，确保所有的干粉沉在管底，加入复溶液后尽量避免产生气泡，反应前检查反应管是否盖紧，避免泄露造成污染。

4. 阳性对照可能会作为污染源，污染其他试剂和待检样品，导致出现假阳性结果，在加样过 程中建议加入阳性对照反应管。

5. 使用显色指示剂时，在反应结束后切忌开盖，以防气溶胶污染。

6. 本试剂盒仅用于食品和环境中样品的检测。

7. 本试剂盒是基于核酸的分子检测，因此并非只能检出唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的活菌，判定结果有时会与传统培养法不同，如需辨明活菌样品存在，请用传统微生物检验方法进行确

   证。

8. 试剂盒中反应管材质为聚丙烯，包装盒材质是纸，使用完毕废弃时按照废弃物相关规定处理，由使用者自行负责处理。

9. 不同批号的产品请勿混合使用，请在有效期内使用试剂盒，由于操作不当引起的误判及有此误判引发的其他事项，本公司概不负责。

   
   

   编号	产品名称	规格	单位
   KJD16L	唐菖蒲伯克霍尔德氏菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24测试/盒	盒
   KJD01L	铜绿假单胞菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD02L	粪链球菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD03L	产气荚膜梭菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD04L	金黄色葡萄球菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD05L	沙门氏菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD06L	志贺氏菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD07L	单核增生李斯特菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD08L	副溶血弧菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD09L	大肠杆菌O157：H7快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD10L	阪崎肠杆菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD11L	小肠结肠炎耶尔森氏菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD12L	布氏杆菌(牛\猪\羊)核酸检测试剂（恒温荧光法）	24测试/盒	盒
   KJD13L	溶藻弧菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒
   KJD14L	创伤弧菌快速检测试剂盒（恒温荧光法）	24tests	盒

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   产品声明: 

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