测定意义：
LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。对于人来说，主要是胰脂肪酶，分解食物中脂肪形成单酰甘油和游离脂肪酸，被人体吸收并重新合成脂肪。外源性脂质摄入过多是引发肥胖的重要原因，血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

实验中所需仪器和用品

甲苯、无水乙醇、研钵、冰、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
基本信息：
产品名称：脂肪酶（LPS)微量法检测试剂盒
测试方法: 微量法
规格 : 100管/96样
货号：GOY-01S6639
分类：脂肪酸代谢系列

试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。
测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，加入4μL标准品，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 对照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸馏水，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
6. 测定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
其中标准管和空白管只需做一管，测定管和对照管每个样均需做。
注意：空白管和标准管只需测定一次。

操作步骤：
1. 样品的准备：产品仅用于科研
a. 细胞样品的准备：收集细胞，用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素钠) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心，取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒（P1511）测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70 ℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 参照下表，根据待检测样品(包括标准品) 数量，配制适量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制：将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀，按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释，即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
3. 样品测定：
a. 参考下表使用96孔板加入各个组分，注意设置样品孔和各种空白对照孔。
注意：加入反应启动工作液后反应即会开始，可以在低温操作或用排枪操作以减小各孔间因加入反应启动工作液的时间先后差异而导致的误差。
b. 37℃孵育30分钟。
说明：孵育25至35分钟检测出来的SOD活力无显著差异，但为保证检测结果的一致性，推荐孵育30分钟。
c. 450nm 测定吸光度。如无450nm 滤光片，可以使用420-480nm 的滤光片。也可以使用大于600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。
4. 样品中总SOD活力的计算：
a. 抑制百分率的计算：
参考如下计算公式计算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白对照1－A空白对照2)－(A样品－A空白对照3)] / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果没有设置空白对照3，则可以把计算公式简化为：
抑制百分率＝(A空白对照1－A样品) / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果计算出来的抑制百分率小于30% 或大于70% ，则通常需要把该样品重新测定。尽量使样品的抑制百分率在30-70%范围内。如果测定出来的抑制百分率偏高，则需适当稀释样品；如果测定出来的抑制百分率偏低，则需重新准备浓度较高的待测样品。
b. SOD酶活力单位的定义：在上述化酶藕联反应体系中抑制百分率为50% 时，反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位 (unit)。注意：SOD的活力单位的定义方式有很多种，不同的活力单位需根据其定义的不同进行适当换算。

小鼠opiorphin(opiorphin)ELISA试剂盒 ，英文名： opiorphin ELISA Kit

大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA检测试剂盒Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 96T/48T

人E选择素(E-Selectin/CD62E)免疫试剂盒 Human E-Selectin ELISA kit

英文名称MouseMMP-1ELISAkit小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)规格：96T/48T

冰冻切片过氧化酶活性(pH7.2超敏型)染色试剂盒50次

RatAmylinELISA试剂盒大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human soluble fibrin monomer complex (SFMC) ELISA Kit 人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试剂盒

Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor15-LO/LOX(Human15-lipoxygenase)ELISAKit人15脂加氧酶规格：48T/96T

饮料离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒20次

MouseLDL-ICELISAKit小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Human talin ELISA Kit 人踝蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-SSTR1 生长抑素受体1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗人IgM 规格 0.1ml

aGT ELISA Kit 大鼠血管紧张素原 96T

NLG1 英文名称： 样蛋白2抗体 0.1ml

Bcl2A1 英文名称： BCL2相关蛋白A1抗体 0.1ml

Anti-SSTR1 生长抑素受体1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
脂肪酶（LPS)微量法检测试剂盒Anti-V.cholera Ogawa/FITC 荧光素标记01群稻叶型霍乱弧菌抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CD38(human) CD38抗原(人)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

细胞表面趋化因子受体9抗体 Anti-CCR-9 0.1ml

SMC1 英文名称： 染色体结构维持蛋白1抗体 0.2ml

ELOVL2 英文名称： 长链脂肪酸延长酶ELOVL2抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HER2 (Tyr877) 0酸化HER2受体抗体 规格 0.1ml

CD38(human) CD38抗原(人)Multi-class antibodies规格： 0.5mg