亮氨酸氨基肽酶(LAP)可见分光光度法检测试剂盒
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亮氨酸氨基肽酶(LAP)可见分光光度法检测试剂盒 | 50管/48样 | GOY-01S6515 |
测定意义:
LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。
测定原理:
LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。。
需自配仪器:
1、酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为450nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、微量移液器
实验方法学:
一、肝素的配制:产品仅用于科研
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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Anti-PEPT1/FITC 荧光素标记肠道肽蛋白1/小肽蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
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SENP5 英文名称: 泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶5抗体 0.2ml
E2 tag 英文名称: E2 tag标签抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSL (Ser865) 0酸化敏感脂肪酶抗体 规格 0.1ml
CBX5(Chromobox Homolog 5) CBX5(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg