测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，加入4μL标准品，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 对照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸馏水，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
6. 测定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
其中标准管和空白管只需做一管，测定管和对照管每个样均需做。
注意：空白管和标准管只需测定一次。

基本信息：
产品名称：羟自由基清除能力微量法检测试剂盒
测试方法: 微量法
规格 : 100管/96样
货号：GOY-01S6441
分类：氧化与抗氧化系列
测定意义：
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

测定原理：

H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基，水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2，3-二羟基苯甲酸，在510nm处有最大吸收峰，加入具有清除能力的物质后，有色物质便会减少，从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。

自备实验用品：

恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

操作步骤：
1. 样品的准备：产品仅用于科研
a. 细胞样品的准备：收集细胞，用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素钠) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心，取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒（P1511）测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70 ℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 参照下表，根据待检测样品(包括标准品) 数量，配制适量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制：将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀，按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释，即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
3. 样品测定：
a. 参考下表使用96孔板加入各个组分，注意设置样品孔和各种空白对照孔。
注意：加入反应启动工作液后反应即会开始，可以在低温操作或用排枪操作以减小各孔间因加入反应启动工作液的时间先后差异而导致的误差。
b. 37℃孵育30分钟。
说明：孵育25至35分钟检测出来的SOD活力无显著差异，但为保证检测结果的一致性，推荐孵育30分钟。
c. 450nm 测定吸光度。如无450nm 滤光片，可以使用420-480nm 的滤光片。也可以使用大于600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。
4. 样品中总SOD活力的计算：
a. 抑制百分率的计算：
参考如下计算公式计算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白对照1－A空白对照2)－(A样品－A空白对照3)] / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果没有设置空白对照3，则可以把计算公式简化为：
抑制百分率＝(A空白对照1－A样品) / (A空白对照1－A空白对照2) × 100%
如果计算出来的抑制百分率小于30% 或大于70% ，则通常需要把该样品重新测定。尽量使样品的抑制百分率在30-70%范围内。如果测定出来的抑制百分率偏高，则需适当稀释样品；如果测定出来的抑制百分率偏低，则需重新准备浓度较高的待测样品。
b. SOD酶活力单位的定义：在上述化酶藕联反应体系中抑制百分率为50% 时，反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位 (unit)。注意：SOD的活力单位的定义方式有很多种，不同的活力单位需根据其定义的不同进行适当换算。

小鼠白介素16(IL16)ELISA试剂盒 ，英文名： IL16 ELISA Kit

人组胺(HIS)ELISA检测试剂盒humanHistamine,HISELISAKIT 96T/48T

大鼠金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒 Rat Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit

英文名称Ratβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗体Ig(A,G,M)(β2-GP1)ELISAKit规格：96T/48T

咖啡阿斯巴塘(aspaame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKiti-PTH人全段甲状旁腺素规格：48T/96T
猪免疫球蛋白A(IgA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human connexin (Cx) ELISA Kit 人间隙连接蛋白(Cx)ELISA试剂盒

PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAMBP(Humanalpha-1-microglobulin/bikuninprecursor)ELISAKit人α1微球蛋白/bikunin前体规格：48T/96T

血液胱氨酸(cystine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

Porcineadiponectin,ADPELISAKit猪脂联素(ADP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
sCD40L ELISA Kit 大鼠可溶性CD40配体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Amylin/FITC 荧光素标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Fascin/Actin bundling protein 肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体 规格 0.2ml

8-OHdG ELISA Kit 大鼠8羟基脱氧鸟苷 96T

MSH gamma 英文名称： 促黑细胞激素γ抗体 0.2ml

phospho-ATF2 (Ser322) 英文名称： 0酸化活化复制因子2抗体 0.1ml

Anti-Amylin/FITC 荧光素标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
羟自由基清除能力微量法检测试剂盒Anti-ZO-1/FITC 荧光素标记胞质紧密粘连蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

膜粘连蛋白 Ⅲ抗体 Anti-Annexin Ⅲ 0.1ml

ZBTB6 英文名称： 锌指蛋白ZBTB6抗体 0.2ml

DACT3 英文名称： Dapper3蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK5( Ser731+Thr733) 0酸化细胞外信号调节激酶5抗体 规格 0.1ml

DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。