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丙-酮酸激酶（PK）测试盒测定意义

测定意义

PK（EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。

测定原理

PK催化磷酸烯醇式丙-酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙-酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

提取液：液体×1瓶，4℃保存。 
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。 
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2.6mL试剂一，充分震荡溶解。 
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2.6mL试剂一，充分震荡溶解。 
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清液待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清等液体：直接测定。
二、测定操作： 
1.分光光度计预热30 min，调节波长到412 nm，蒸馏水调零。 
2.试剂二置于37℃水浴中预热30min。 
3.空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL蒸馏水、800 μL试剂一、50μL试剂二和50 μL试剂三，迅速混匀，于412nm处测定3min内吸光值变化，第10s吸光值记为A1，第190s吸光值记为A2。△A空白管=A2－A1 
4.测定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液、800 μL试剂一、50μL试剂二和50 μL试剂三，，迅速混匀，于412nm处测定3min内吸光值变化，第10s吸光值记为A3，第190s吸光值记为A4。△A测定管=A4-A3 

丙-酮酸激酶（PK）测试盒产品优点如下：
1、快速简便：双试剂，96孔板直接操作，快速、简便。
2、取样量微：需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高：检测线0.5U/ml，是羟胺法5倍，邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好：批内CV=5.50%,批间CV=3.32%，试剂盒2～8℃存放3个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.2%。
6、回收试验： X =102.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。且特异性强，不受类SOD物质的干扰
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。

丙-酮酸激酶（PK）测试盒产品售后有保障、品质无忧    高保障    品质现货

1.严格的质量控制：严格检测每一批产品，确保产品稳定性，灵敏度。
2.专业的产品包装：适应产品特性的包装，确保运输的安全性和存储的有效性
3.秉持“客户购买我们的产品就是收获一份价值，一份安心的信念，竭诚提供优质产品，售后服务无优