微源检测HPLC-MS仪器分析茶皂素黄酮苷组分
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HPLC/MS分析茶皂素黄酮苷组分
黄酮苷属黄酮类,是一种茶多酚物质。黄酮类化合物是存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物。其羟基衍生物多具黄色,故又称黄碱素或黄酮。目前黄酮类化合物的检测多以系统溶剂分离法或是柱层析法等作为主要实验方法。微源实验室查阅文献资料,利用HPLC/MS分析方法以日常中茶麸茶皂素为例实验了黄酮苷组分的检测。
将茶麸用正己烷溶剂脱脂,干燥粉碎后取用适量,加入120%(W/W)的乙醇溶液浸取,液泵循环1.5h左右滤出溶剂,重复操作浸提3次合并滤液,得皂素液。将皂素液与萃取剂在分液漏斗中混合,振摇10min,静置分层。分离干燥后得到样品,准确称量2.0mg样品用1ml色谱纯MeOH溶解过滤待进样检测。按照表格条件得到茶皂素HPLC分析图谱如下:
色谱柱 | 2.0×50mmID3μMerckC18 |
柱温 | 室温 |
流动相 | A:0.05%甲酸溶液,B:0.05%甲酸的乙腈溶液 |
检测波长 | 200nm |
进样体积 | 5uL |
离子源 | ESI(电喷雾) |
质量范围 | 100-1750m/z |
毛细管 | 160.0V |
干燥气 | 350℃ |
干燥器流速 | 11L/min |
从分析图谱来看,峰1和峰2峰面积较大,推测为主要的黄酮苷成分,可以将这两种主要黄成分分离并分别收集,采用紫外吸收结合香草醛显色,判断确认这两个峰是黄酮苷类化学成分。分离纯化后的均为纯的化合物,无杂峰出现,得到2种黄酮苷的HPLC分析图谱。
利用HPLC对样品进行分析,达到分离技术条件,再以HPLC/MS分析确定化合物的分子量等结构确认信息,不仅可以判断分子离子峰,还可以在黄酮苷类化合物中较快地看出糖的个数及糖分子量,整个实验过程重复性好得到数据精密度高,各项组分的检测结果符合标准。
公司介绍:
微源检测,是集研发分析测试服务、药物质量研究、基因毒杂质研究、元素杂质研究、结构确认、生物药分析服务等一体,面向全球的独立第三方生物医药研发测试服务公司。
由国内领先的科学服务企业上海泰坦科技股份有限公司(简称:泰坦科技)参股成立,秉承“让检测精准又高效”的价值观:
l资质实验室 CMA,CNAS,按照ISO-17025和GMP要求建立的实验室
l建设有1500+平米的高标准生物医药实验室
l专业技术研发团队成员经验丰富,3天出具检测结果
l现有精密分析仪器100+台,均安装网络版审计追踪软件
l已服务100+生物制药企业
l现已成功完成2189个项目
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微源检测定制的个性化方案,为客户提供了专业可靠,高效率、高质量、合规的检测分析服务。协助客户解决了检测,分析,测试等各类问题,缩短了工艺验证或方法建立所用的时间,降低研发风险,缩短研发周期,推进产品的市场化进程。