和大家聊聊miRNA酶联免疫分析，可能大家不知道miREIA是个啥，它的完整名称是microRNA Enzyme Immunoassay，是BioVendor用于miRNA定量的一种新方法。下面简单介绍一下：

microRNA Enzyme Immunoassay（以下简称“miREIA”）的检测原理：

将生物素标记的特异性DNA寡核苷酸与样本中分离出的miRNA杂交。 然后将DNA / RNA杂交体转移到固相上，固相涂有对完美匹配的RNA / DNA-生物素杂交体的特异单克隆抗体。然后将洗涤后的固相与链霉亲和素-HRP偶联物一起孵育，并通过发色底物?3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）进行显色观察，吸光度与血液样本中存在的特定miRNA种类的浓度成比。

同时测试miREIA在各种生物样品中的性能。使用miREIA试剂盒对从全血，HeLa细胞，外周血单核细胞，结直肠癌组织，关节滑液，唾液和尿液样本中分离的miRNA进行定量，结果表明，该miREIA试剂盒可以很好的对上述所有样本中的miRNA进行定量，检测结果如下：

全血样本中miRNA的分离及定量：将全血收集到PAXgene血液RNA收集管中。 使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA，该试剂盒旨在从培养的细胞，人/动物组织，植物组织和全血中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了十二种不同miRNA的浓度。

Hela细胞样本中miRNA的分离及定量： 使用 RNA分离试剂盒（RIK001）从HeLa细胞中分离RNA。8种不同miRNA的浓度由miREIA试剂盒测定.

PBMC细胞样本中的miRNA定量：采用His-topaque密度梯度离心法从全血中分离外周血单核细胞(PBMC)。使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA。7种不同mirna的浓度由miREIA试剂盒测定.

直肠癌组织样本中miRNA提取及定量：切除获得的结直肠癌(CRC)组织被稳定并储存在RNAlater溶液中。使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA。8种不同mirna的浓度由miREIA试剂盒测定.

关节滑液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒（RIK002）从滑液中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了五个不同miRNA的浓度.

唾液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒（RIK002）从唾液中分离RNA。 通过BioVendor miREIA试剂盒测量了两种不同的miRNA的浓度.

尿液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清 RNA分离试剂盒（RIK002）从尿液中分离RNA。通过miREIA试剂盒测量了两种不同miRNA的浓度。

文章来源：miRNA定量的方法——miREIA

https://www.amyjet.com/featured/mireia.shtml

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