牛口蹄疫I型抗体(FMD-I-Ab)ELISA检测试剂盒
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牛口蹄疫I型抗体(FMD-I-Ab)ELISA检测试剂盒实验原理:
试剂盒采用夹心酶免法,采用了两种高特异性抗体,TMB作为着色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中指标的量成正比
检测范围:参考说明书
使用前,所有样品应平衡至室温,大约30min,然后充分混匀,确保试剂质量无变化,标准曲线和样品检测同时进行
试剂 | 检测样品 | 标准品 | 检测样品对照孔 | 试剂对照孔 |
检测样品100ul | 稀释标准品(1-7管)100ul | EIA缓冲液(第8管) 100ul | EIA缓冲液100ul | |
盖板,37℃下孵育60min | ||||
洗板7次 | ||||
酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
盖板,4℃下孵育30min | ||||
洗板9次 | ||||
显色剂 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室温避光温育30min | ||||
终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加终止液后30min内450nm处读取OD值 |
牛口蹄疫I型抗体(FMD-I-Ab)ELISA检测试剂盒操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
牛口蹄疫I型抗体(FMD-I-Ab)ELISA检测试剂盒自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
牛口蹄疫I型抗体(FMD-I-Ab)ELISA检测试剂盒特别注意:
1. 样品采集后应立即检测,如需贮存的,则应放置在冰冻条件下,避免反复冻融,检测前应在低温下将其溶解并完全混合
2. 如有需要,样品可用EIA缓冲液稀释
3. 建议试验样品和标准品做双份检测
4. 试验样品应在中性PH范围内,有机溶剂的污染会影响试验
5. 只能使用试剂盒内提供的洗涤液洗板,洗板不充足可能会导致试验失败
6. 倒去洗涤液,吸水纸上拍干,不能用吸水纸擦拭微孔
7. 底物液应避光保存,因其对光敏感,且要避免接触金属
8. 加入终止液后30min内读数
本产品仅用于科研,不能用于临床
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