牛白血病病毒(BLV)检测试剂盒(RT-PCR法)
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【产品名称】
商品名称:牛白血病病毒(BLV)核酸检测试剂盒
(RT-PCR
Name :Diagnostic Kit for Bovine leukemiavirus RNA
(RT-PCR Fluorescence Probing)
【包装规格】48 份/盒
【预期用途】
本试剂盒适用于检测的牛肿瘤组织、全血、鼻液、唾液、牛奶等液体样本等标
本中牛白血病病毒 RNA,适用于牛白血病病毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参
考。
【检验原理】
本试剂盒用一对牛白血病病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步
法荧光 RT-PCR 技术对牛白血病病毒 RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑
感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名 称 规 格
酶液 50μl×1 管
BLV 反应液 1.0ml×1 管
BLV 阳性质控品 50μl ×1 管
阴性质控品 250μl ×1 管
说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融少于 5 次,
有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ
Opticon2 等其他荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】
肿瘤组织;抽取全血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管;鼻液、唾液、牛奶等液体样本。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标
本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
ELISA常见问题:牛白血病病毒(BLV)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三类:液体中纯化的自然抗原、合成抗原和基因重组抗原。
纯度不高可导致试剂盒的特异性不强,合成抗原一般都是多肽抗原,
试剂盒一般为基因重组抗原。抗原纯度不高,特异性就不强,
2、抗体特异性和亲和力的大小会影响试剂盒的特异性和敏感性
3、酶结合物,试剂盒的保存时间通常由酶的稳定性决定。
最常用的就是辣根过氧化酶-HRP.其他还有碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA温浴和洗涤一般为磷酸盐缓冲液(PBS)
碱性磷酸酶的话就不能用PBS洗涤了,因为残留的PBS会抑制一半的酶活性。
TMB显色液取代了OPD为HRP最常用的色原底物。为氧化还原反应(OPD对机体有突变作用,所以改用TMB)
◆ 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1)第一区:样本制备区。
2)第二区:模板添加区。
3)第三区:扩增及产物分析区。
★ 分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。