邦景大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA检测试剂盒
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商品参数
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品牌 邦景
产品名称 大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA检测试剂盒
英文名称 RANTES ELISA Kit
规格 96T/48T
类别 ELISA检测试剂盒
货号 BJ-E7415
用途 公司产品仅用于科研
特点 灵敏性高、特异性强、重复性好
商品介绍

产品名称:大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA检测试剂盒

英文名称:RANTES/CCL5

规格:96T/48T

特点:灵敏性高、特异性强、重复性好

用途:科研实验等领域科学研究,产品仅用于科研不得用于临床诊断

运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)

试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。

待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等


需自备试剂和器材:

1. 标准规格酶标仪。

2. 自动洗板机。

3.  37℃恒温箱。

4. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时用多通道移液器。

5. 干净的试管和 Eppendof 管。

6. 使用中性 PBS 或 TBS 作为洗涤液。0.01M TBS   配法为:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 纯乙酸 450μ l 或浓盐酸 700μ l 左右调节 pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS(pH7.2-7.6)  配法:1000ml 蒸馏水中加氯化钠 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸盐,应加上分子式中水的含量。

9.  蒸馏水

10. 吸水纸

样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 产品仅用于科研不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 


实验步骤:

石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 

1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr; 

2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次

10 min; 

3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%

乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min; 

4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温

度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×

2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,

直接进入第 5 步封闭。 

5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min; 

6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜; 

7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 

8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min; 

9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育

30 min; 

10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 

11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min; 

12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37

℃湿盒中孵育 30 min; 

13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min); 

14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色; 

15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明; 

16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片; 

17.观察成像: 显微镜下观察成像。 

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大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA检测试剂盒磺磺标准品Human OC ELISA Kit纯度:0.996

磺甲噁唑N4- 葡标准品Human Bone morphogenetic protein receptor II ELISA Kit纯度:0.994

磺甲恶唑标准品Human Bone morphogenetic protein receptor 1A ELISA Kit纯度:0.97

磺甲噻二唑标准品Human Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit纯度:0.997

磺二甲嘧啶标准品HumanBone morphogenetic protein 6 ELISA Kit纯度:0.999

磺甲基嘧啶标准品Human Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit纯度:0.999

周效磺标准品Human Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit纯度:0.999

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公司名称 上海邦景实业有限公司
联系卖家 陈丽
电话 钺钹钳-钼钹钴钸钺钴钼钹
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地址 上海市闵行区