猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA
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猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA*上海沪峥!您做实验的*伙伴!
英文名称:PoFAine Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA kit
ELISA试剂盒规格 | 48T | 96T | 保存 |
酶标包被板 | 1X48 | 1X96 | 4℃/-20℃ |
标准品 | 0.5ml X 1瓶 | 0.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
标准品稀释液 | 1.5ml X 1瓶 | 1.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
酶标试剂 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
样品稀释液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
显色剂A液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
显色剂B液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
终止液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
25倍浓缩洗涤液 | 20ml X 1瓶 | 20ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 |
|
密封袋 | 1个 | 1个 |
|
说明书 | 1份 | 1份 |
|
猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA实验步骤:
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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