准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

普通PCR反应流程：

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

反应五要素：

河流弧菌PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

使用方法 ：   

1 实验所需器材与试剂

1.1 器材

1）PCR仪

2）PCR反应管

3）电泳仪及水平电泳槽

4）高速离心机

5）微量移液器及移液器吸头

1.2 试剂

1）琼脂糖

2）EB（溴化乙锭）

3）去离子水或双蒸水

注意事项：   

5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。

5.2 操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。 5.3 实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。

5.4 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。

5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。

Porcine Histamine, HIS Elisa Kit恶性因子（1-34）酰胺，人Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine Estradiol, E2 Elisa Kit恶性因子（1-34）， 人Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine Estradiol, E2 Elisa Kit样生长因子I（57-70）Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine transforming growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit样生长因子Ⅱ（69-84）Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine transforming growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit白介素-1β转化酶底物Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit下钙素Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit肯普肽Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine adiponectin, ADP Elisa Kit运动升压素Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine adiponectin, ADP Elisa Kit层粘连蛋白（925-933）Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine apoprotein B100, apo-B100 Elisa Kit层粘连蛋白（929-933）Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine apoprotein B100, apo-B100 Elisa Kit层粘连蛋白九肽，酰胺Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine apoprotein A1, apo-A1 Elisa Kit白细胞焦激肽（4-8）；Pheromonotropic五肽Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine apoprotein A1, apo-A1 Elisa Kit黄体生成激素释放激素（4-10）Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit淋巴细胞激活五肽Porcine/猪Elisa试剂盒规格：48T

Porcine insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit蜂毒素Porcine/猪Elisa试剂盒规格：96T

Porcine insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa KitMetamorphosin APorcine/猪Elisa试剂盒规格：48T
河流弧菌PCR检测试剂盒HSL/LIPE  荷尔蒙敏感脂肪酶抗体Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit  小鼠粘蛋白/粘液素5B规格 96T

Phospho-HSL (Ser959+960)  磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit  兔白介素10规格 96T

Phospho-HSL (Ser863)  磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK) ELISA Kit  人皮肤T细胞虏获趋化因子规格 96T

Phospho-HSL (Ser865)  磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit  豚鼠免疫球蛋白G规格 96T

Phospho-HSL (Ser660)  磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit  大鼠血小板生成素规格 96T

HRASLS2  HRAS样抑制因子2抗体Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit   小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽规格 96T

Hrasls3/HREV107  HRAS样抑制因子3抗体IFN- Gamma ELISA Kit（mouse）   小鼠γ干扰素规格 96T

HSD11B1/HSD1  羟基类固醇脱氢酶11β1抗体FSH Poultry ELISA Kit  FSH 禽类酶联免疫ELISA试剂盒规格 96T