上海一研生物科技有限公司
主营产品: 生化试剂 ELISA试剂盒, 检测试剂盒, 免疫组化试剂盒, 分子生物学试剂盒
克氏食道线虫PCR检测试剂盒
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反应五要素:
克氏食道线虫PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
克氏食道线虫PCR检测试剂盒 | Oesophagostomum clumbianumPCR | 50T |
普通PCR反应流程:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法 :
1 实验所需器材与试剂
1.1 器材
1)PCR仪
2)PCR反应管
3)电泳仪及水平电泳槽
4)高速离心机
5)微量移液器及移液器吸头
1.2 试剂
1)琼脂糖
2)EB(溴化乙锭)
3)去离子水或双蒸水
注意事项:
5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。
5.2 操作时应尽量少说话,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性;整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。 5.3 实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。
5.4 反应管中加好所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免形成过多的二聚体。
5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度,建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。
人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit 质量规格:辣椒总碱>98%,辣椒单碱>55%
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit 质量规格:>99%
人FMS样酪激酶3(Flt3)ELISA Kit 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人FMS样酪激酶3配体(Flt-3L)ELISA Kit 质量规格:HPLC≥95.50%,标准品
人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA Kit 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人H-Ras ELISA Kit 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA Kit 质量规格:HPLC≥99%,标准品
人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA Kit 质量规格:HPLC≥98%,标准品
香菇 Lentinula edodesH4(人脑神经细胞)
异常毕赤酵母 Pichia anomala中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
SPC-A-1(人肺细胞)HHCC(人肝细胞)
玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae大豆慢生根瘤菌
葡萄牙假丝酵母 Candida lusitaniae人小气道平滑肌细胞完全培养基
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC试剂盒黑曲霉 Aspergillus niger
根瘤菌 Rhizobium sp.威氏李斯特氏菌 Listeria welshimeri
热带假丝酵母 Candida tropicalis毛柄鳞伞 Pholiota mutabilis
葛根素Goat Anti Rabbit/Mouse IgG-Biotin(Ready to Use)山羊抗兔/鼠IgG,Biotin(IHC工作液)
巴斯德毕赤酵母 Pichia pastoris中性红染色液(活细胞染色用)
293A,人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别)HFF-1(人成纤维细胞)
人神经星形胶质细胞完全培养基尖镰孢
河流弧菌球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis
克氏食道线虫PCR检测试剂盒TRPM3 瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体(M亚家族)规格:96T/48T英文名称:Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA Kit进口/分装
TRPM5 瞬时受体电位离子通道蛋白5抗体(M亚家族)规格:96T/48T英文名称:Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit特价供应
TRPM6 瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体(M亚家族)规格:96T/48T英文名称:Mouse cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit进口/原装
TRPM1 瞬时受体电位离子通道蛋白1抗体(M亚家族)规格:96T/48T英文名称:Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit 特价促销
TRPM4 瞬时受体电位离子通道蛋白4抗体(M亚家族)规格:96T/48T英文名称:Mouse cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit进口/分装
DIS3L 有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体规格:96T/48T英文名称:Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit进口/原装
DIS3L2 有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体规格:96T/48T英文名称:Mouse Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit特价促销
DOM3Z DOM3Z蛋白抗体规格:96T/48T英文名称:Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit进口/分装