准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

普通PCR反应流程：

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

反应五要素：

墨累谷脑炎病毒PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

使用方法 ：   

1 实验所需器材与试剂

1.1 器材

1）PCR仪

2）PCR反应管

3）电泳仪及水平电泳槽

4）高速离心机

5）微量移液器及移液器吸头

1.2 试剂

1）琼脂糖

2）EB（溴化乙锭）

3）去离子水或双蒸水

注意事项：   

5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。

5.2 操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。 5.3 实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。

5.4 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。

5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。

大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒 质量规格：>98%Isopteropodine

大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 质量规格：>99%,BRIsoproterenol Hydrochloride

大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 质量规格：含量测定Isopropyl Palmitate

大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA试剂盒 质量规格：>98%Isopropyl Myristate

大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒 质量规格：>99%Isopropyl Acetate

大鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒  质量规格：>98%,MGMT 的抑制剂Isopropamide Iodide

大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 质量规格：HPLC≥98%,标准品Isoniazid

大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒 质量规格：>98%Isometheptene Mucate

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae无花果曲霉 Aspergillus ficuum

HB611(人肝细胞)HET-1A, 人食管上皮细胞

大豆慢生根瘤菌

HO-8910(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）

KP-N-NS(人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移))5×106cells/瓶×2

组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重组蛋白英文名称：Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)

阻抑素(PHB)重组蛋白英文名称：Recombinant Prohibitin (PHB)

着丝粒蛋白F(CENPF)重组蛋白英文名称：Recombinant Centromere Protein F (CENPF)

转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)重组蛋白英文名称：Recombinant Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI)

松弛肽(RLN)重组蛋白英文名称：Recombinant Relaxin (RLN)

白介素17(IL17)重组蛋白英文名称：Recombinant Interleukin 17 (IL17)

科玛嘉大肠杆O157菌显色培养基 规格： 1000ml 用途： 此培养基用于分离和鉴定大肠杆菌O157
墨累谷脑炎病毒PCR检测试剂盒AKR1A1  乙醇脱氢酶1抗体规格:96T/48T英文名称：Human neuraminidase,NA ELISA Kit特价促销

ALAD  δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体规格:96T/48T英文名称：Human Cobra venom neuronal protective factor，CVNPF ELISA Kit进口/原装

TPTE  肿瘤/抗原44抗体规格:96T/48T英文名称：Human Neurokinins B，NKB ELISA Kit特价供应

ALDH16A1  乙醛脱氢酶16家庭A1抗体规格:96T/48T英文名称：Human Neurotensin,NT ELISA Kit进口/分装

ALG11  天门冬酰胺连接糖基化11抗体规格:96T/48T英文名称：Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 特价促销

ALS2CR4  肌萎缩侧索硬化症相关蛋白4抗体规格:96T/48T英文名称：Human neurofilament protein,NF ELISA Kit特价促销

AMIGO3  粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体规格:96T/48T英文名称：Human myelin protein 2，p2 ELISA Kit特价促销

AMN1  细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体规格:96T/48T英文名称：Human neuropeptide Y，NP-Y ELISA Kit特价促销