准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

普通PCR反应流程：

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

反应五要素：

曼氏杆菌通用PCR检测试剂盒PCR检测试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

使用方法 ：   

1 实验所需器材与试剂

1.1 器材

1）PCR仪

2）PCR反应管

3）电泳仪及水平电泳槽

4）高速离心机

5）微量移液器及移液器吸头

1.2 试剂

1）琼脂糖

2）EB（溴化乙锭）

3）去离子水或双蒸水

注意事项：   

5.1使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。

5.2 操作时应尽量少说话，因口腔中也含有支原体，可能引起样品污染，而造成假阳性；整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行，以避免交叉污染。 5.3 实验时，试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀（混匀时禁止激烈振荡，只需要进行上下倒置多次进行混匀）。

5.4 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。

5.5细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度，建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。

大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 质量规格：>98%,BRQuazepam CIV

大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒 质量规格：>98%,BRPyrvinium Pamoate

大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒 质量规格：>98%,BRPyruvic Acid

大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒 质量规格：>98%,BRPyrimethamine

大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒  质量规格：>98.5%,BRPyrilamine Maleate

大鼠轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒 质量规格：0.98Pyridostigmine Bromide

大鼠特异生长因子/相关因子(TGSF)ELISA试剂盒 质量规格：0.98Pyrethrum Extract

大鼠相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒 质量规格：>98%Pyrazinamide

黑曲霉 Aspergillus niger豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人结直肠腺细胞粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis人大隐平滑肌细胞完全培养基

球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

人卵巢透细胞细胞人绒毛膜间充质基质细胞

L-Glutamine (100X)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

胰蛋白酶(含100mL 酶解缓冲液)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

SGC-7901, 人胃腺细胞系苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

NRK(大鼠肾细胞)粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

COLO 201(人结直肠腺细胞)MGC80-3(人胃细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus

人直平滑肌细胞完全培养基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
曼氏杆菌通用PCR检测试剂盒PCR检测试剂盒GTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期应答相关蛋白1抗体规格:96T/48T英文名称：Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit进口/分装

HIPK4  同源相互作用蛋白激酶4抗体规格:96T/48T英文名称：Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody，EHF IgG ELISA Kit进口/分装

AMBRA1  自噬相关基因AMBRA1抗体规格:96T/48T英文名称：Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody，EHF IgM ELISA Kit进口/分装

IBRDC2/RNF144B  E3泛素蛋白连接酶144B抗体（环指蛋白144B）规格:96T/48T英文名称：Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISA Kit特价供应

JMY  连接介导调节蛋白抗体规格:96T/48T英文名称：Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit特价供应

LRDD/PIDD  富含亮氨酸重复死亡结构域蛋白抗体规格:96T/48T英文名称：Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit特价促销

MCG10  RNA相关结合蛋白MCG10抗体规格:96T/48T英文名称：Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit进口/原装

NME6/IPIA ALPHA  P53诱导细胞凋亡抑制蛋白α抗体规格:96T/48T英文名称：Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA Kit进口/分装